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이매스교육 및 공지사항

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  • 제목

    Edman Sequencing 시료 (PVDF) 준비 시 유의사항 공지
  • 작성자

    이매스
  • 첨부파일

안녕하세요.

이매스 분석센터 분석 담당자입니다.

다름이 아니라 최근 N 말단 서열 분석을 의뢰하시는 고객분들의 시료 중 Edman sequencing 분석을
위해 PVDF transfer 시료를 준비하는 과정에서 최종 glycine 오염 peak 에 의한 간섭이 심하게 관찰되는 경우가 있어
이 부분에 대한 trouble shooting 을 위해 몇 가지 유의 사항을 안내 해드립니다.

1) Towin buffer 를 사용하시는 경우
PVDF blotting 과정이 끝난 직후, membrane 의 3차 증류수로 5분 이상 2~3 회 세척을 부탁드립니다.
그 과정을 생략하는 경우 Tris /Glycine 의 오염으로 인한 간섭이 Edman sequencing 반응 효율성을 떨어뜨리는 결과를 초래합니다.

2) Staining solution 의 재사용 시
Edman Sequencing 분석에 사용가능한 staining solution 은 CBB dye 와 Ponceus S 이렇게 두 가지 staining solution 이 호환 가능합니다.
만약 이들 staining solution 을 재사용하시는 경우 가장 큰 문제가 membrane 유래 glycine 의 오염이 지속적으로 영향을 미치게 됩니다.
따라서 이들 solution 은 1회 사용 후 페기 하시기 바랍니다.